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NPG-B2M 小鼠

1. 基(ji)本信息(xi)

品系名称:NOD-B2Mem1vst Prkdcscid Il2rgtm1vst/Vst

常用名:NPG B2M; NPG-B2M KO; NOD-scid gamma B2M

背景:NOD-scid /NcrCrl

毛色(se):    白色(se)


品系建立:

采用CRISPR-CAS9技术(shu)将NPG小鼠的MHC class I 分子B2M (beta-2 microglobulin)基因(yin)2号外显(xian)子及附近(jin)内含子删除了674bp,获得B2M 基因(yin)敲除的NPG小鼠。

经过(guo)PBMC移植(zhi)实验,证明该(gai)小(xiao)鼠(shu)比(bi)NPG小(xiao)鼠(shu)晚发生GVHD(体重、活动能力、姿势、毛发和(he)(he)皮肤(fu)完整(zheng)性等),可以用于外周血人源(yuan)化和(he)(he)Hu-NPG B2m-CDX/PDX小(xiao)鼠(shu)药效学实验。


2. 表型(xing)分析

B2M基因编码的β2 microglobulin是MHC I类分子的亚基。MHC I类分子介导的T细胞反应在异种排斥反应中起到重要作用。B2M基因敲除后,小鼠细胞表面不再表达MHC I类分子,人PBMC移植后发生的人源免疫细胞攻击小鼠细胞的移植物抗宿主病(GVHD)被显著减弱,GVHD发生的时间从移植后平均3-4周延迟到平均6-8周。使用NPG B2m小鼠建立PBMC人源化小鼠模型可以比NPG小鼠的PBMC模型获得更长的实验窗口期,因而是一种更理想的人源化小鼠模型,在肿瘤免疫研究中具有重要应用价值。


(1)Hu-NPG B2m小鼠同NPG小鼠类(lei)似,可以实现人外周(zhou)血的高水平重建。 

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图1 使用(yong)8只(zhi)NPG B2m小(xiao)鼠(shu)和8只(zhi)NPG小(xiao)鼠(shu)移植5*106 PBMC细胞(bao),每周(zhou)外(wai)周(zhou)血(xue)中人的CD45+阳性细胞(bao)的百分(fen)比流式分(fen)析结果,NPG B2m小(xiao)鼠(shu)比NPG小(xiao)鼠(shu)重建的速(su)度和水平都(dou)缓(huan)慢一(yi)些(xie),可(ke)能是延缓(huan)GVHD发生的一(yi)个重要指标(biao)。


(2)NPG B2m与NPG小鼠相(xiang)比,移(yi)植PBMC细胞后(hou)可以延缓(huan)GVHD的发生。

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图2 NPG B2M(B2M)与NPG格3只小(xiao)鼠,分(fen)别移(yi)植5*106 人PBMC细胞,6只小(xiao)鼠的(de)体重变化(hua)曲(qu)线,可(ke)见B2M体重可(ke)以维持2~3个月;与NPG小(xiao)鼠相比,延缓了GVHD的(de)发生。


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图3 左图为(wei)B2M小鼠(shu),移(yi)植PBMC后(hou)5w未发生GVHD ;右(you)图为(wei)NPG小鼠(shu),移(yi)植PBMC后(hou)5w出(chu)现GVHD。


(3)Hu-NPG B2M- CDX(HCC827)小鼠药效学实验(Data from Crownbio )。

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图4 使(shi)用(yong)NPG和NPG B2M小鼠,各(ge)5只(zhi),成功建立人源化PBMC的人非小细(xi)胞肺癌(ai)细(xi)胞 CDX模型。

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图5 使用NPG和(he)(he)NPG B2M小(xiao)鼠,各5只,成功建立人(ren)源化PBMC的(de)人(ren)非小(xiao)细胞(bao)肺(fei)癌细胞(bao) CDX模(mo)(mo)型,两(liang)种(zhong)模(mo)(mo)型的(de)存活曲(qu)线,可见Hu-PBMC-NPG B2M-CDX与(yu)Hu-PBMC-NPG-CDX小(xiao)鼠相比,明显的(de)延缓了GVHD和(he)(he)死亡的(de)发生。


3. 应用领域

-异源移(yi)植(zhi)GVHD体内机(ji)理研究

-Hu-NPG.B2M-PDX小(xiao)鼠药(yao)效学实验,如(ru)肿瘤免(mian)疫抗(kang)体药(yao)物、Car-T的(de)药(yao)效研(yan)究(jiu)等

-新的人(ren)源化动物模(mo)型研发


4. 参考文献

(1)King MA; Covassin L; Brehm MA; Racki W; Pearson T; Leif J; Laning J; Fodor W; Foreman O; Burzenski L; Chase TH; Gott B; Rossini AA; Bortell R; Shultz LD; Greiner DL. 2009.

(2)Human peripheral blood leucocyte non-obese diabetic-severe combined immunodeficiency interleukin-2 receptor gamma chain gene mouse model of xenogeneic graft-versus-host-like disease and the role of host major histocompatibility complex. Clin Exp Immunol 157(1):104-18.