im体育

服务热线

+8610-84928167

扩(kuo)繁(fan)

目前(qian)小鼠(shu)(shu)品(pin)系(xi)(xi)(xi)已(yi)达上万种(zhong),大鼠(shu)(shu)品(pin)系(xi)(xi)(xi)也(ye)超过上千种(zhong),这些(xie)品(pin)系(xi)(xi)(xi)的(de)(de)(de)繁(fan)(fan)(fan)殖性能(neng)千差万别(bie),需(xu)要根据具体(ti)品(pin)系(xi)(xi)(xi)的(de)(de)(de)特点,针对性的(de)(de)(de)优(you)化种(zhong)群管理方案(an)(an)。依(yi)托20年的(de)(de)(de)大小鼠(shu)(shu)种(zhong)群管理经验和(he)完善的(de)(de)(de)动(dong)物设施质控体(ti)系(xi)(xi)(xi),im体育可以根据客户(hu)需(xu)要,制定合适(shi)的(de)(de)(de)扩繁(fan)(fan)(fan)方案(an)(an),提供(gong)品(pin)系(xi)(xi)(xi)建立、常规扩繁(fan)(fan)(fan)、快速扩繁(fan)(fan)(fan)和(he)活体(ti)保种(zhong)等专业服务。

 

1. 品系建立

大(da)小鼠(shu),按照育种(zhong)方式不同,分为近交(jiao)系和封闭(bi)群(qun)(qun)。JAX将遗(yi)传(chuan)背景不清楚的;或(huo)(huo)者(zhe)首建鼠(shu)(Founder)来(lai)源于3种(zhong)或(huo)(huo)以上品系;或(huo)(huo)者(zhe)首建鼠(shu)是远交(jiao)系(Outbred),统(tong)称(cheng)(cheng)为群(qun)(qun)(STOCK)。比如,STOCK按照全同胞(bao)兄妹交(jiao)配20代(dai)之(zhi)前,仍称(cheng)(cheng)为STOCK;兄妹交(jiao)配20代(dai)之(zhi)后,称(cheng)(cheng)为近交(jiao)系(Inbred)。


术(shu)语(yu)

定义和说明(ming)

STOCK(群)

一(yi)个独(du)立(li)的繁育群体。

Line(系(xi))

谱(pu)系明确(que)的一群(qun)动物(wu),且(qie)来源于同一父母。

Inbred strain(近交系)*

至少(shao)连续(xu)20代兄(xiong)妹交配培育而成(cheng)的品系(xi)。所有动物都(dou)可追溯于(yu)同2只首建鼠。

Subline(亚系)

按照(zhao)近(jin)交系(xi)标准独立于原近(jin)交系(xi)繁育的(de)一(yi)群小鼠(shu)。如(ru)许多常见近(jin)交系(xi)的(de)亚系(xi)(C57BL/6J,   C57BL/6N)。

Coisogenic(同类系)

有一(yi)个基因(yin)改变(bian)的近(jin)交(jiao)系(xi)。如许多在近(jin)交(jiao)系(xi)上进(jin)行基因(yin)修饰操作后获得的品系(xi)。

Inbred substrain(近交(jiao)亚(ya)系)*

按照近交系标准繁育(yu)20代的(de)(de)亚系,或(huo)者已经明(ming)确(que)与近交系的(de)(de)遗传(chuan)区(qu)别(甚至是1个(ge)基因的(de)(de)区(qu)别)。

对于随机转基(ji)(ji)因和CRISPR技术(shu)产生的敲除鼠,由于插入位点/删除碱(jian)基(ji)(ji)数/拷贝数的不(bu)(bu)同,每一只founder(F0)的基(ji)(ji)因和表型(xing)可能不(bu)(bu)同。im体育可以为(wei)客(ke)户(hu)提供标准(zhun)的品系建立服务,筛选到符合实(shi)验(yan)需要的基(ji)(ji)因编辑模(mo)型(xing)(品系,见下图,源于JAX)。


 image.png


2. 快速扩繁

采用(yong)超(chao)数排卵的方法(fa)获得(de)卵母细胞,通过(guo)新鲜或冷(leng)冻精(jing)子(zi)进行体外受精(jing)(IVF),将2-cell时(shi)期的受精(jing)卵胚(pei)胎(tai)移植到代(dai)(dai)孕小(xiao)(xiao)鼠(shu)体内,一(yi)代(dai)(dai)获得(de)大量子(zi)代(dai)(dai)小(xiao)(xiao)鼠(shu)的过(guo)程。


image.png


(1) 快速扩繁服务优点:

-只(zhi)需要提供(gong)精(jing)子(zi)或少(shao)量雄性小鼠(shu);

-6~12周即可(ke)提供(gong)大(da)量同批次后(hou)代;

-基(ji)因(yin)敲除或(huo)CKO小(xiao)鼠繁育周期缩(suo)短30~50%。


序号

仔鼠数量

快速扩繁时间

传统扩繁时间

1

30只(zhi)后代

6周

24周

2

50只后代

6~8周

24周

3

100只后代

8~10周

32周

4

150只后代(dai)

8~12周(zhou)

40周(zhou)

5

200只后代

8~12周

46周

*数据源于B6背景小鼠


(2)科学经济扩繁方案制定:

按照计(ji)划扩(kuo)繁(fan),获(huo)得足(zu)够数量的大小(xiao)鼠模型,是确保实验进行的前提。im体育主要依据大小(xiao)鼠的扩(kuo)繁(fan)性(xing)能和行业认可的扩(kuo)繁(fan)性(xing)能计(ji)算公式,制(zhi)定(ding)科学(xue)经济的扩(kuo)繁(fan)方(fang)案。

(1)基本(ben)生理参数:

-小鼠(shu)6~8周(zhou)左右性(xing)(xing)成熟,大鼠(shu)8~10周(zhou)左右性(xing)(xing)成熟

-小鼠孕期(qi)(qi)约(yue)(yue)3周(zhou)(zhou)(19~21天);大鼠孕期(qi)(qi)约(yue)(yue)3.2周(zhou)(zhou)(22~25天)

-首胎(tai)间隔4~6周。

-小鼠(shu)传(chuan)一代(dai)需要3个月左右。

(2)影响扩(kuo)繁速度的(de)雌雄鼠因素:

①雄(xiong)鼠,精子(zi)数量(liang)多,只要具有受精能力(li),一般不是(shi)限(xian)速(su)因(yin)素;

②雌(ci)鼠(shu),孕期3周,哺乳3~4周,窝间隔一般1.5~2个月(yue),常常是限速因素。

(3)基因型杂合鼠的快速扩繁

使用基因(yin)阳性的雄鼠,与同背景的野生雌鼠卵(超(chao)排获得卵)作IVF快速扩繁,2个月左右即可获得100只以上的后代(根(gen)据(ju)实验需要,移植(zhi)对应数量的受精卵2-cell期胚胎)。

(4)基(ji)因型纯合的(de)快速扩(kuo)繁

如果(guo)有(you)大量的纯(chun)合基因阳性雌鼠(shu),可以(yi)直接自然扩(kuo)繁(fan)或(huo)作(zuo)IVF扩(kuo)繁(fan)。一般(ban)情况下(xia)没有(you)纯(chun)合或(huo)杂合的基因阳性雌鼠(shu),只能使用野(ye)生型雌鼠(shu)超排,作(zuo)IVF获得F1杂合后代;然后到F2代才能获得纯(chun)合鼠(shu)。

(5)多基因快速扩繁

由于快速扩繁,依(yi)赖于订购大量的(de)野生型同背景雌(ci)鼠(shu)获取(qu)卵进行IVF,即(ji)在1代时间内(nei)可以(yi)获得大量的(de)杂(za)合小鼠(shu)。对于多基因扩繁,情况会比较复杂(za)多样,会根据(ju)客户需求(时间和成本),提供(gong)适合的(de)方案。


3.活体保种

若短时间(jian)内(nei)不用大小(xiao)鼠(shu)模型,也(ye)可以(yi)(yi)小(xiao)规模的活(huo)体(ti)保种。根据发育性能,基因型,繁育周期,进行科学的留(liu)种和换(huan)种计划,避(bi)免出现不育,以(yi)(yi)最小(xiao)的笼位数维持种群。一般小(xiao)鼠(shu)2~4笼;大鼠(shu)3~5笼进行活(huo)体(ti)保种。