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NPG-B2M 小鼠

1. 基本(ben)信息

品系名称:NOD-B2Mem1vst Prkdcscid Il2rgtm1vst/Vst

常用名:NPG B2M; NPG-B2M KO; NOD-scid gamma B2M

背(bei)景:NOD-scid /NcrCrl

毛色(se):    白色(se)


品(pin)系建立:

采用CRISPR-CAS9技术将(jiang)NPG小(xiao)鼠的(de)MHC class I 分(fen)子(zi)B2M (beta-2 microglobulin)基因(yin)2号(hao)外显(xian)子(zi)及附近内含子(zi)删(shan)除(chu)了674bp,获得B2M 基因(yin)敲除(chu)的(de)NPG小(xiao)鼠。

经过(guo)PBMC移植(zhi)实验(yan),证明该小鼠比NPG小鼠晚发(fa)生GVHD(体重、活(huo)动(dong)能力、姿势、毛发(fa)和皮肤(fu)完整性等),可以(yi)用(yong)于外周血人源化(hua)和Hu-NPG B2m-CDX/PDX小鼠药效学(xue)实验(yan)。


2. 表型分析

B2M基因编码的β2 microglobulin是MHC I类分子的亚基。MHC I类分子介导的T细胞反应在异种排斥反应中起到重要作用。B2M基因敲除后,小鼠细胞表面不再表达MHC I类分子,人PBMC移植后发生的人源免疫细胞攻击小鼠细胞的移植物抗宿主病(GVHD)被显著减弱,GVHD发生的时间从移植后平均3-4周延迟到平均6-8周。使用NPG B2m小鼠建立PBMC人源化小鼠模型可以比NPG小鼠的PBMC模型获得更长的实验窗口期,因而是一种更理想的人源化小鼠模型,在肿瘤免疫研究中具有重要应用价值。


(1)Hu-NPG B2m小(xiao)(xiao)鼠同NPG小(xiao)(xiao)鼠类似,可以(yi)实(shi)现人外(wai)周血的高水平(ping)重建。 

 5dca06b37bf52.png                                   

图(tu)1 使用(yong)8只(zhi)NPG B2m小鼠(shu)和8只(zhi)NPG小鼠(shu)移植(zhi)5*106 PBMC细胞,每周外周血中人的CD45+阳性细胞的百分(fen)比流式(shi)分(fen)析结果,NPG B2m小鼠(shu)比NPG小鼠(shu)重建的速度和水平都(dou)缓(huan)慢(man)一些,可能(neng)是延缓(huan)GVHD发(fa)生(sheng)的一个(ge)重要指标。


(2)NPG B2m与NPG小鼠相(xiang)比,移植PBMC细(xi)胞(bao)后(hou)可以延缓(huan)GVHD的发生。

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图2 NPG B2M(B2M)与NPG格(ge)3只小鼠,分(fen)别移植5*106 人PBMC细胞,6只小鼠的(de)体(ti)重(zhong)变化曲线,可见B2M体(ti)重(zhong)可以(yi)维持(chi)2~3个月;与NPG小鼠相(xiang)比,延缓了GVHD的(de)发生。


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图3 左图为B2M小鼠,移植PBMC后5w未发生GVHD ;右(you)图为NPG小鼠,移植PBMC后5w出现(xian)GVHD。


(3)Hu-NPG B2M- CDX(HCC827)小鼠药效学实验(yan)(Data from Crownbio )。

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图(tu)4 使用NPG和NPG B2M小鼠(shu),各5只,成功(gong)建立人源化PBMC的人非小细胞(bao)肺癌细胞(bao) CDX模型。

  5dca07550169c.png                   

图(tu)5 使用NPG和(he)NPG B2M小(xiao)鼠(shu),各(ge)5只(zhi),成(cheng)功建立人源化PBMC的(de)人非小(xiao)细(xi)(xi)胞肺癌细(xi)(xi)胞 CDX模型,两种模型的(de)存活曲线,可见Hu-PBMC-NPG B2M-CDX与(yu)Hu-PBMC-NPG-CDX小(xiao)鼠(shu)相比,明(ming)显的(de)延缓(huan)了(le)GVHD和(he)死亡的(de)发(fa)生。


3. 应用领域

-异(yi)源(yuan)移(yi)植GVHD体内机理研究

-Hu-NPG.B2M-PDX小鼠(shu)药效学实验,如肿瘤免(mian)疫抗体(ti)药物、Car-T的药效研(yan)究等(deng)

-新的人(ren)源化动物模型研发


4. 参考文献

(1)King MA; Covassin L; Brehm MA; Racki W; Pearson T; Leif J; Laning J; Fodor W; Foreman O; Burzenski L; Chase TH; Gott B; Rossini AA; Bortell R; Shultz LD; Greiner DL. 2009.

(2)Human peripheral blood leucocyte non-obese diabetic-severe combined immunodeficiency interleukin-2 receptor gamma chain gene mouse model of xenogeneic graft-versus-host-like disease and the role of host major histocompatibility complex. Clin Exp Immunol 157(1):104-18.