im体育

服务热线(xian)

+8610-84928167

URG 小(xiao)鼠

1.基本信(xin)息

品系名称:NOD.Cg-Tg(tetO- Alb- uPA)1Deng Rag2tm1VstIl2rgtm1Vst /Vst

常用名:URG®小鼠;Tet-uPATg Rag2null Il2rgnull 小鼠

背景:NOD

毛(mao)色:白(bai)色


品系建立:

URG®小鼠,由4种基因修饰动物模型交配获得,包含2个转基因和2个基因敲除。2006年,宋希军等研究人员构建了TRE-uPA 转基因小鼠和Alb-rtTA转基因小鼠,然后交配获得了Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性小鼠;通过Dox诱导,在该小鼠中检测到了uPA表达和肝损伤[1]。im体育技术人员将Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性小鼠连续8代回交到NRG(NOD背景的Rag2null Il2rgnull小鼠)背景,2012年获得Alb-rtTA/ TRE-uPA/Rag2null/Il2rgnull 小鼠,商品名为URG®小鼠。

作为新一代的可调控肝损伤人源化肝脏小鼠模型[2~6],人源肝脏细胞可以实现20-95%整肝重建。


2. 表(biao)型

(1)URG®同NRG(NOD-Rag2null Il2rgnull)小鼠一样,可以常规扩繁,并且可以在任何时间点用Dox诱导肝损伤。

  5dc91f8c8073b.png        5dc91fde18206.png

图1  URG®小(xiao)鼠肝(gan)损伤分(fen)析。在(zai)不(bu)诱导(dao)(dao)时,检测不(bu)到表(biao)达uPA表(biao)达(C);在(zai)DOX饮水(shui)诱导(dao)(dao)后(hou),免(mian)疫组化可以检测到uPA的表(biao)达(D)。uPA表(biao)达的肝(gan)脏(zang)呈苍(cang)白色(F);野生(sheng)小(xiao)鼠的肝(gan)脏(zang)是暗红色(G)。HE染色可见URG®小(xiao)鼠肝(gan)细(xi)胞空(kong)泡化(H),而对(dui)照小(xiao)鼠肝(gan)细(xi)胞形态正常(I)。


(2)URG®人肝脏细胞可以实现20%~95%的重建,外周血中人ALb逐步升高(gao)到毫克级的水平(ping)

5dc91fca00755.png

图2 URG®小(xiao)鼠(shu)人肝(gan)细胞重(zhong)建(jian)。(A,B) HE染(ran)色证(zheng)明人肝(gan)脏细胞在URG小(xiao)鼠(shu)肝(gan)脏中成(cheng)功(gong)重(zhong)建(jian),染(ran)色浅的部(bu)分(fen)为人肝(gan)脏细胞;(C)人肝(gan)细胞移植(zhi)后(hou),随着时间延长,小(xiao)鼠(shu)外周血(xue)(xue)中人血(xue)(xue)清白蛋白(human albumin)水(shui)平(ping)逐渐升高到毫(hao)克(ke)级(ji)水(shui)平(ping)。


(3)RT-PCR 和免疫组化(Albumin, CK18, CYP3A4)确认肝(gan)脏(zang)人源化URG®小鼠嵌合肝(gan)中人特异标记(ji)表达

5dc91ffacc48e.png

图3  人(ren)(ren)源化URG®小鼠,人(ren)(ren)鼠嵌合鼠肝脏RT-PCR分析表达人(ren)(ren)特异的基(ji)因(A);和(he)人(ren)(ren)Albumin, CK18, CYP3A4免疫组化染(ran)色(se)阳性(B)。


(4)肝脏人源化URG®小鼠HBV感染和HBV核心和C抗原组化染色

5dc9200c1a4c1.png

图4  人(ren)源化URG®小鼠,支(zhi)持(chi)人(ren)HBV病毒的感(gan)染。A,人(ren)源化URG®小鼠外周血中,HBV拷贝数的定量RT-PCR分析;B,HBV表面抗(kang)原和(he)核心抗(kang)原染色阳性。


3. 应用领(ling)域

-URG® 小鼠和肝脏人源化URG® 小鼠可以用于人特异的肝病、药物安全性评估和人特异的肝脏代谢酶相关的研究

-HBV,HCV感染研究

-药(yao)物代(dai)谢(xie)与药(yao)代(dai)动力学研究

-干细(xi)胞研究

-基(ji)因治疗


4. 参(can)考(kao)文献

(1)Xijun Song,Yushan Guo,Shuguang Duo,Jie Che,Chen Wu,Takahiro Ochiya,Mingxiao Ding,Hongkui Deng.A Mouse Model of Inducible Liver Injury Caused by Tet-On Regulated Urokinase for Studies of Hepatocyte Transplantation.The American Journal of Pathology.Volume 175, Issue 5, November 2009, Pages 1975-1983.

(2)Du, Y., Wang, J., Jia, J., Song, N., Xiang, C., Xu, J., Hou, Z., Su, X., Liu, B.,Jiang, T., et al. (2014). Human hepatocytes with drug metabolic function induced from fibroblasts by lineage reprogramming. Cell Stem Cell, 14,394–403.

(3)Azuma, H. et al. Robust expansion of human hepatocytes in Fah-/-/Rag2-/-/Il2rg-/- mice. Nature biotechnology 25, 903-910, doi:10.1038/nbt1326 (2007).

(4)Bissig, K. D. et al. Human liver chimeric mice provide a model for hepatitis B and C virus infection and treatment. The Journal of clinical investigation 120, 924-930, doi:10.1172/JCI40094 (2010).

(5)Xu, D. et al. Chimeric TK-NOG mice: a predictive model for cholestatic human liver toxicity. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics 352, 274-280, (2015).

(6)Lander FoquetElizabeth M. WilsonLieven VerhoyeMarkus GrompeGeert Leroux-RoelsJohn BialPhilip Meuleman. Successful Engraftment of Human Hepatocytes in uPA-SCID and FRG® KO Mice.Hepatocyte Transplantation pp 117-130.