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hPD-1

1. 基(ji)本信息

品系名称:B6-Pdcd1em1(hPdcd1)Vst/Vst

常用名C57BL/6-PD-1人源化小鼠; PD-1人源化小鼠

背景C57BL/6NCrl

毛色黑色


品系建立

采用CRISPR-Cas9辅助的方(fang)法,将小(xiao)鼠程序性死亡受体1基因(yin)(Pdcd1 or PD-1,programmed death 1))的胞外区替换为人(ren)源的序列。这样在PD-1人(ren)源化小(xiao)鼠体内,使用人(ren)源PD-1抗体抑制剂时(shi)就可以识别,进(jin)行相关的药效或药物(wu)筛选实验。


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图1 PD-1人(ren)源化打靶策略示意图,将C57BL/6N小鼠的PD-1胞(bao)外区替换为人(ren)源的序列。


2. 表型分析(xi)

(1)FACS检测PD-1人源(yuan)化(hua)小鼠脾脏和胸(xiong)腺淋巴(ba)细胞表达(da)hPD-1。

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图2  流(liu)式分析人PD-1在(zai)脾脏和胸腺淋巴细(xi)胞(bao)的表(biao)(biao)达情况。结果C57BL/6N野生小鼠基(ji)本检测不到(dao)表(biao)(biao)达,hPD-1小鼠,特别(bie)是共刺激(ji)后(costimulation)hPD-1小鼠的脾脏和胸腺淋巴细(xi)胞(bao)可以检测到(dao)表(biao)(biao)达。


(2)体内药效验证

将PD-1人源化(hua)小鼠(shu)皮下接种小鼠(shu)MC38结肠(chang)癌(ai)细胞系,将动物随机分(fen)成(cheng)2组(zu)(zu)(n=6,雌雄各(ge)半),对照组(zu)(zu)注射生理盐水,实验(yan)组(zu)(zu)注射Keytruda,每周给药(yao)(yao)2次,连续给药(yao)(yao)6次。结果(guo)显示,雌性和雄性PD-1人源化(hua)小鼠(shu)均为理想的体内药(yao)(yao)效试验(yan)模型,Keytruda均表现出明显的抑瘤(liu)效果(guo)。                            

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图3  PD-1人(ren)(ren)源化小鼠模型可以成功(gong)应用(yong)于抗PD-1人(ren)(ren)源化抗体效果的(de)评价(jia)。阳性(xing)药物Keytruda在人(ren)(ren)源化PD-1小鼠上表(biao)现出明显的(de)抑瘤效果,而且不存在性(xing)别差异(雌性(xing)和雄性(xing)PD-1人(ren)(ren)源化小鼠),均为理想的(de)体内药效试验模型。

                                               

3. 应(ying)用领域(yu)

PD-1是一种重要的(de)(de)(de)免(mian)疫抑制分子,为CD28超(chao)家族(zu)成员。im体育研发(fa)的(de)(de)(de)PD-1人源化小鼠,接种MC38肿(zhong)瘤细胞系后,注(zhu)射PD-1抑制剂Keytruda后,表现出明(ming)显的(de)(de)(de)肿(zhong)瘤缩小和消失,可以用于PD-1相关的(de)(de)(de)药效或(huo)药物(wu)筛选(xuan)实验(yan)。

另(ling)外对以(yi)PD-1为靶点的免疫(yi)(yi)调节对抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫(yi)(yi)性疾病及(ji)器官移植(zhi)存活(huo)等均有重要(yao)的意义。


4. 参考文献

(1)Shinohara T, Taniwaki M, Ishida Y, Kawaichi M, Honjo T (October 1994). "Structure and chromosomal localization of the human PD-1 gene (PDCD1)". Genomics. 23 (3): 704–6.