im体育

服务热(re)线

+8610-84928167

辅助(zhu)生殖

多种原(yuan)因可(ke)以造(zao)(zao)成大小鼠(shu)繁(fan)育出现障碍,如由(you)于老龄化造(zao)(zao)成精(jing)子(zi)活力的降低,或(huo)(huo)由(you)于疾病或(huo)(huo)意外造(zao)(zao)成繁(fan)育期动(dong)(dong)物生(sheng)命垂危,这(zhei)时可(ke)以通(tong)过im体育提(ti)供的辅助生(sheng)殖技术进(jin)行动(dong)(dong)物品(pin)系的恢复。


体外输(shu)精

可以将(jiang)冻精复苏(su)后,或者(zhe)新鲜(xian)精液输送到发情期大小鼠子(zi)宫的(de)技术(shu)。操作比(bi)较简单,缺点是需要(yao)精子(zi)的(de)量比(bi)较大。

体外(wai)受精

体外受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(In Vitro Fertilization,IVF)是指哺乳(ru)动物的(de)(de)(de)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)和(he)卵(luan)子(zi)(zi)(zi)在体外完成受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)过程的(de)(de)(de)技术(shu)。小鼠(shu)(shu)体外受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)技术(shu)可(ke)以(yi)分(fen)为冷冻(dong)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)体外受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)和(he)新(xin)鲜(xian)分(fen)离(li)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)体外受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)。在小鼠(shu)(shu)体外受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)技术(shu)的(de)(de)(de)发(fa)展中,有3个技术(shu)优(you)(you)化(hua)特(te)别重要,显(xian)著提(ti)高(gao)(gao)了小鼠(shu)(shu)体外受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)的(de)(de)(de)成功率。(1)添(tian)加(jia)环状糊精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(MBCD)提(ti)高(gao)(gao)了精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)获(huo)(huo)能(neng)的(de)(de)(de)效率,超(chao)活(huo)化(hua)(鞭(bian)打(da)运动)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)比例(li)增加(jia),从(cong)而(er)提(ti)高(gao)(gao)IVF的(de)(de)(de)效率。获(huo)(huo)能(neng)后的(de)(de)(de)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)才具有受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)能(neng)力(li),研究表明牛(niu)(niu)血清(qing)蛋(dan)(dan)白(BSA)、牛(niu)(niu)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)浆蛋(dan)(dan)白(BSP)、高(gao)(gao)密度(du)脂蛋(dan)(dan)白(HDL)和(he)MBCD等会促使精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)膜上(shang)胆(dan)(dan)固醇(chun)流失(shi),诱(you)导精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)获(huo)(huo)能(neng)。MBCD增加(jia)蛋(dan)(dan)白质(zhi)酪(lao)氨酸磷酸化(hua)的(de)(de)(de)能(neng)力(li),与胆(dan)(dan)固醇(chun)强烈结合,破(po)坏脂筏(lipid rafts),从(cong)而(er)实现高(gao)(gao)比例(li)的(de)(de)(de)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)获(huo)(huo)能(neng)。(2)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)和(he)卵(luan)子(zi)(zi)(zi)IVF过程的(de)(de)(de)优(you)(you)化(hua),①高(gao)(gao)钙(gai)(2.04mM提(ti)高(gao)(gao)到5.09mM)、添(tian)加(jia)Reduced glutathione (GSH)和(he)不含脂肪(fang)酸的(de)(de)(de)BSA-HTF受(shou)(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)液(ye);②合适的(de)(de)(de)卵(luan)母(mu)细(xi)胞采(cai)集(ji)时间(jian),包括(kuo)超(chao)数(shu)排卵(luan)和(he)体外采(cai)集(ji)卵(luan)母(mu)细(xi)胞的(de)(de)(de)时间(jian)。(3)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)冻(dong)存的(de)(de)(de)优(you)(you)化(hua),经典的(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)是1990年报道的(de)(de)(de)R18S3的(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)(18%的(de)(de)(de)棉子(zi)(zi)(zi)糖+3%脱脂乳(ru))。在2010年Takeo和(he)Nakagata教授报道添(tian)加(jia)l-glutamine可(ke)以(yi)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)冷冻(dong)复苏(su)效率(小鼠(shu)(shu)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)冻(dong)存复苏(su)和(he)IVF的(de)(de)(de)发(fa)展历史,见下图。摘(zhai)至Cryobiology, 2018, doi: 10.1016/j.cryobiol.2018.04.008.)。


5dca4f18c9951.png

目前小(xiao)鼠(shu)体外受精技术基本是从(cong)上面三个方面进行优(you)(you)化,im体育公(gong)司在(zai)以(yi)上技术的基础上,优(you)(you)化了成功率。


胞(bao)质内单精注(zhu)射

当精(jing)子(zi)失去运动能力时,im体育采(cai)用单精(jing)胞(bao)(bao)质(zhi)内(nei)注(zhu)射(she)(she)进行品(pin)系(xi)的(de)恢复。单精(jing)子(zi)卵(luan)胞(bao)(bao)浆显微(wei)注(zhu)射(she)(she)(ICSI)是使用显微(wei)操作技术将精(jing)子(zi)注(zhu)射(she)(she)到卵(luan)细胞(bao)(bao)胞(bao)(bao)浆内(nei),使卵(luan)子(zi)受(shou)精(jing),体外培养到早期(qi)胚胎,再(zai)放回母体子(zi)宫内(nei)发育着床(chuang)。小鼠的(de)单精(jing)子(zi)注(zhu)射(she)(she)技术比较成熟,基(ji)本(ben)采(cai)用piezo辅助的(de)技术,将部分(fen)断尾(wei)的(de)精(jing)子(zi)头(tou)注(zhu)射(she)(she)到MII期(qi)的(de)卵(luan)细胞(bao)(bao)胞(bao)(bao)浆内(nei)。

尽(jin)管ICSI技(ji)术需要的精(jing)子数量少,对精(jing)子活力没有要求,但尽(jin)量还是要选择来(lai)源和保存方法明确(que)(que)的精(jing)子,至少确(que)(que)保精(jing)子DNA的完(wan)整性,这样(yang)ICSI获得的小(xiao)鼠(shu)胚胎才可(ke)能发育(yu)成存活的小(xiao)鼠(shu)。


卵巢移植

若(ruo)雌性(xing)动物(wu)意外死亡,或者客(ke)户有按(an)照标准(zhun)程序(xu)冻存的卵(luan)巢(chao)小(xiao)组织块时,im体育提供卵(luan)巢(chao)移植的方法恢(hui)复小(xiao)鼠(shu)或大鼠(shu)品系。


辅助(zhu)(zhu)生(sheng)殖技(ji)术是确保模型小鼠满足(zu)CRO、科研和(he)(he)生(sheng)产需要的基本技(ji)术,可以解决小鼠准备和(he)(he)扩繁过程中遇(yu)到(dao)的各种问题。辅助(zhu)(zhu)生(sheng)殖技(ji)术在大小鼠模型领域(yu)的应用主要包括:

快速扩繁,一代(dai)可以获(huo)得大(da)量小鼠;

可(ke)以同一天移植大量胚胎(tai),得(de)到大批量同日龄小(xiao)鼠;

小鼠(shu)丧失交配能力(li),或者不(bu)育;

雄(xiong)鼠数量少,需要快速扩群;

出(chu)现微生物污染,需(xu)要净化;

冷冻精(jing)子(zi),需(xu)要恢(hui)复成小(xiao)鼠;

获得大量(liang)胚(pei)胎,用于冻(dong)存(cun)、显微(wei)注射(she)或(huo)者其(qi)他(ta)试验研究;

受(shou)精(jing)机理(li)的研(yan)究(jiu)

另外,im体育可(ke)以(yi)协助客(ke)户进行(xing)辅助生殖技(ji)术(shu)的(de)(de)(de)研发(fa)(fa)。通过模(mo)拟(ni)体(ti)内受(shou)精和(he)发(fa)(fa)育(yu)环境,提高受(shou)精和(he)发(fa)(fa)育(yu)的(de)(de)(de)效率(lv);在培养体(ti)系中(zhong)添加蛋白质、生长因子(zi)和(he)化学(xue)小(xiao)分子(zi),以(yi)期阐明受(shou)精和(he)胚胎(tai)发(fa)(fa)育(yu)的(de)(de)(de)机制(zhi),提供更加适(shi)合受(shou)精和(he)发(fa)(fa)育(yu)的(de)(de)(de)体(ti)外条件。这些(xie)技(ji)术(shu)可(ke)以(yi)简(jian)单(dan)的(de)(de)(de)归(gui)为三(san)类:(1)胚胎(tai)或配子(zi)移(yi)植(zhi)(zhi);(2)亚细(xi)胞(bao)水平的(de)(de)(de)移(yi)植(zhi)(zhi),如细(xi)胞(bao)核移(yi)植(zhi)(zhi);(3)多能性细(xi)胞(bao)分化或转分化,如ES或者(zhe)皮肤细(xi)胞(bao)分化成胚胎(tai),即不依赖生殖细(xi)胞(bao)直(zhi)接在体(ti)外人造胚胎(tai)。在这些(xie)技(ji)术(shu)中(zhong),胚胎(tai)移(yi)植(zhi)(zhi),体(ti)外受(shou)精和(he)单(dan)精注射相对(dui)成熟,已经商业化应(ying)用(yong)。


年代

方法

简(jian)介(jie)

应用

1890~

胚胎移植(ET)

同步化(hua)代孕受体的输卵(luan)管或者子宫移植

技术成(cheng)熟,商业化(hua)普及

1952~

细胞核移植(CNT)

将胚胎细胞(bao)(bao)、ES细胞(bao)(bao)或体细胞(bao)(bao)的(de)核显微(wei)注(zhu)射到去(qu)核的(de)卵(luan)母细胞(bao)(bao)中

研发优化(hua)中,

商(shang)业化公司(si)少

1959~

体(ti)外受精(jing)(IVF)

获(huo)能(neng)的精子(zi)与成熟的卵体外受精

技(ji)术成熟,商业化普及

1976~

单精注射(ICSI)

直接将精(jing)子(zi)或去尾的(de)精(jing)子(zi)注(zhu)射到卵(luan)母细胞中

技术成熟,难度较大,商业化推广(guang)中

1992~

重组卵(luan)巢(chao)移植(zhi)(ROT)

卵(luan)巢(chao)(chao)组织移植;或者(zhe)原始生殖细胞(PGCs)与胚(pei)胎(tai)期(qi)卵(luan)巢(chao)(chao)体细胞重(zhong)新聚合在一起(qi);移植到受体鼠的卵(luan)巢(chao)(chao)囊或者(zhe)肾囊下,重(zhong)组的卵(luan)巢(chao)(chao)中(zhong)卵(luan)子形成(cheng)后(hou),可以自(zi)然(ran)交配或者(zhe)ICSI获(huo)得后(hou)代(dai)小鼠

研发优化(hua)中,

商业化公(gong)司(si)少

2009~

重(zhong)组睾丸移植(RTT)

原始生殖细(xi)胞(bao)(bao)(PGCs)与胚胎(tai)期睾(gao)丸(wan)体细(xi)胞(bao)(bao)重新聚合(he)在一起;移植(zhi)到受体鼠的(de)睾(gao)丸(wan)囊(nang),这些重组的(de)睾(gao)丸(wan)中精子形成后(hou)(hou),可以自然交配或(huo)者ICSI获得(de)后(hou)(hou)代小鼠

研发(fa)中

2018

人造胚(pei)胎(tai)

3D基质培养,获得(de)3胚层特征的胚胎样结构,符合胚胎的特征

研发(fa)中