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HBV小鼠

1. 基本信(xin)息

品系名称:B6-Tg (HBV)5 Vst /Vst

常用名C57BL/6-HBV; HBV 转基因小鼠

背景C57BL/6NCrl

毛色黑色


品系建立

将1.28倍长度的HBV(A型,GenBank: AF305422.1) 线性化片段注入C57BL/6NCrl小鼠胚胎原核,获得转基因阳性小鼠。通过外周血HBV拷贝数分析,保留了拷贝数达到108 IU/ml的首建鼠。按照半合子配野生C57BL/6NCrl小鼠的方式建立了HBV转基因小鼠品系。


2. 表型分析

(1)外周血(xue)中人乙肝(gan)e抗原(yuan),乙肝(gan)表面抗原(yuan)和(he)外周血(xue)HBV病毒拷(kao)贝数分析表明,雌鼠和(he)雄(xiong)鼠均有较高水平的表达(da)。

性别

数(shu)量

平均值

体重(g)

HBeAg(COI)

HBSAg(COI)

HBV-DNA(IU/ml)

70

17.99

495.21

5.80E+04

5.25E+07

70

22.13

846.61

1.29E+05

6.77E+07



HBV DNA数据散点图(平均值为(wei)5.25E+07)

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图1  5~8周龄HBV小(xiao)鼠外周血(xue)中HBV病(bing)毒拷贝(bei)数分析。



②HBeAg(COI) 数(shu)据散点(dian)图(平均值为495.21)

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图2  5~8周龄HBV小鼠外周血中(zhong)e抗原HBeAg(COI)分(fen)析。


(2)不同月龄HBV小鼠肝(gan)脏、脾脏大体观(Chin Hepatol, 2018, 23(1): 26-30)

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图3 不同(tong)月(yue)龄HBV小鼠肝脏、脾脏大体观(guan)。



(3)不同月龄HBV小鼠(shu)肝体比、脾体比,差异不显(xian)著(Chin Hepatol, 2018, 23(1): 26-30)

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图4 不同月龄HBV小(xiao)鼠肝(gan)体(ti)比、脾体(ti)比。



(4)采(cai)用HBV Tg小鼠(shu)和CCL4诱导结合,可以成功建立乙肝(gan)肝(gan)纤(xian)维(wei)化小鼠(shu)复合模型(xing)(参见Acta Lab Anim Sci Sin,2019,27(5))。

      5dca247d70994.png

图5  6种小鼠模型(xing)肝组织病理HE、天狼猩红(hong)染色与胶原半定量分析。A. 肝组织病理HE、天狼猩红(hong)染色;B. 胶原染色半定量分析;**P < 0.01 vs WT,▲▲P < 0.01 vs rAAV+CCl4,n = 5。(参(can)见Acta Lab Anim Sci Sin,2019,27(5))。


研究数据表明HBV Tg 小鼠在(zai)联合CCl4 染毒12 周后(hou)能够稳定成模(mo)。合理地(di)选用小鼠慢性乙肝模(mo)型(xing)可(ke)以有效解决HBV 在(zai)病毒感染、复(fu)制、免疫应(ying)答和药物评(ping)价(jia)方(fang)面的(de)难题。



3. 应(ying)用领域(yu)

高(gao)水平表达HBV病(bing)毒的(de)小鼠模(mo)型(xing),为(wei)(wei)研究(jiu)病(bing)毒和(he)宿(su)主因素(su)影响HBV复制(zhi)、发病(bing)基因和(he)生理学过(guo)程提供了部分可(ke)能性;为(wei)(wei)控制(zhi)HBV复制(zhi)研究(jiu),提供了稳定(ding)可(ke)遗传的(de)小动物(wu)模(mo)型(xing)。

该模型可用于研究HBV、治疗药物和(he)疫苗及更(geng)下(xia)游的(de)慢性肝炎和(he)纤维化(hua)(结合化(hua)学(xue)诱(you)导)。



4. 注意(yi)事(shi)项

(1)因为B6背景雄鼠(shu)大于(yu)6周(zhou)龄后(hou)极容易发生(sheng)咬(yao)架打斗情况,为避(bi)免意外发生(sheng),建议单(dan)只单(dan)笼饲养和(he)实(shi)验(yan)。若(ruo)实(shi)验(yan)空间紧张,建议选(xuan)择雌鼠(shu)进(jin)行实(shi)验(yan)。

(2)根据卫生部文件《人间传染的病原(yuan)微(wei)生物(wu)名录》,HBV属于第三类病毒,需要在ABSL-2(BSL-2)设施进(jin)行实验。

(3)为了确保安全,建议(yi)接(jie)(jie)种HBV疫苗后,HBV抗体(ti)阳性的人员,才能接(jie)(jie)触该(gai)动物进行实验(yan)(yan)和实验(yan)(yan)。

(4)实验(yan)小鼠、排泄(xie)物、垫料和相关设施,按照ABSL-2(BSL-2)要(yao)求(qiu)进行处理。



5. 参(can)考文献

(1)LG Guidotti, B Matzke, HSchaller and F V Chisari. J. Virol. 1995, 69(10):6158.

(2)J. Ren, L.Wang, Z. Chen, et al. Journal of Medical Virology 78:551–560 (2006).

(3)黄恺, 孙鑫, 赵(zhao)志敏,等. 两种乙(yi)肝肝纤维化(hua)小鼠复合模型的(de)比(bi)较[J]. 中(zhong)国实验动物学报,2019,27(5).Huang K,Sun X,Zhao ZM, et al. Comparison of two composite mouse models of hepatitis B fibrosis. Acta Lab Anim Sci Sin,2019,27(5).

(4)孙(sun)鑫,黄恺,赵志敏,等(deng). C57BL/6N-Tg(1.28HBV)/Vst 乙肝病(bing)毒(du)转基因小鼠肝脏(zang)炎(yan)症与纤维(wei)化的病(bing)理(li)特点. 肝脏(zang),2018, 23(1): 26-30. Sun X,Huang K,Zhao ZM, et al. Pathological features of liver inflammation and fibrosis in hepatitis B virus transgenic mice C57BL/6N -Tg(1.28HBV) /Vst [J]. Chin Hepatol, 2018, 23(1): 26-30.