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hPD-1小鼠

1. 基(ji)本信息

品系名称:B6-Pdcd1em1(hPdcd1)Vst/Vst

常用名C57BL/6-PD-1人源化小鼠; PD-1人源化小鼠

背景C57BL/6NCrl

毛色黑色


品系建立

采用CRISPR-Cas9辅(fu)助的(de)方法(fa),将小鼠(shu)(shu)程序性死(si)亡(wang)受体(ti)1基因(Pdcd1 or PD-1,programmed death 1))的(de)胞外区替换为(wei)人源(yuan)(yuan)的(de)序列。这(zhei)样在(zai)PD-1人源(yuan)(yuan)化小鼠(shu)(shu)体(ti)内,使用人源(yuan)(yuan)PD-1抗体(ti)抑制剂时就(jiu)可(ke)以(yi)识别,进(jin)行相关的(de)药(yao)效(xiao)或(huo)药(yao)物(wu)筛(shai)选实验。


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图1 PD-1人源化打(da)靶策略示意图,将C57BL/6N小(xiao)鼠的(de)PD-1胞(bao)外区(qu)替换为(wei)人源的(de)序(xu)列。


2. 表型分析

(1)FACS检测(ce)PD-1人源化(hua)小鼠脾脏和(he)胸腺淋巴(ba)细胞表达h Pdcd1。

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图2  流式分析人PD-1在脾脏(zang)和(he)胸(xiong)腺淋(lin)巴(ba)细(xi)胞的表达(da)情况。结果C57BL/6N野(ye)生小鼠(shu)基本检(jian)测不到(dao)表达(da),hPD-1小鼠(shu),特别(bie)是共刺激(ji)后(costimulation)hPD-1小鼠(shu)的脾脏(zang)和(he)胸(xiong)腺淋(lin)巴(ba)细(xi)胞可以检(jian)测到(dao)表达(da)。


(2)体内(nei)药效验(yan)证

将(jiang)PD-1人源化(hua)小(xiao)鼠皮下接种小(xiao)鼠MC38结(jie)(jie)肠癌细胞系(xi),将(jiang)动物随机分成2组(n=6,雌雄(xiong)各半),对照组注(zhu)射(she)生理盐(yan)水(shui),实验(yan)组注(zhu)射(she)Keytruda,每(mei)周给药(yao)2次,连续给药(yao)6次。结(jie)(jie)果显示(shi),雌性和(he)雄(xiong)性PD-1人源化(hua)小(xiao)鼠均(jun)为理想的(de)体内药(yao)效试验(yan)模型,Keytruda均(jun)表现(xian)出明显的(de)抑(yi)瘤效果。                            

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图3  PD-1人(ren)(ren)(ren)源(yuan)化小鼠模(mo)型可以(yi)成功应用于抗PD-1人(ren)(ren)(ren)源(yuan)化抗体效果的(de)评价。阳性药物(wu)Keytruda在人(ren)(ren)(ren)源(yuan)化PD-1小鼠上表现出(chu)明显(xian)的(de)抑瘤效果,而且不(bu)存在性别差异(雌(ci)性和雄性PD-1人(ren)(ren)(ren)源(yuan)化小鼠),均为理想(xiang)的(de)体内药效试验模(mo)型。

                                               

3. 应用领域

PD-1是一种(zhong)重要的(de)(de)免疫抑制(zhi)分子,为(wei)CD28超家(jia)族成员。im体育研发(fa)的(de)(de)PD-1人(ren)源化小鼠,接种(zhong)MC38肿瘤(liu)细胞系(xi)后,注射PD-1抑制(zhi)剂Keytruda后,表(biao)现出(chu)明显的(de)(de)肿瘤(liu)缩小和消失(shi),可以用于PD-1相关(guan)的(de)(de)药效或药物筛选实验。

另(ling)外对以PD-1为(wei)靶点(dian)的(de)免疫调节对抗(kang)肿瘤、抗(kang)感染、抗(kang)自身免疫性疾病及器官移植存(cun)活等均有重要的(de)意义。


4. 参考文献(xian)

(1)Shinohara T, Taniwaki M, Ishida Y, Kawaichi M, Honjo T (October 1994). "Structure and chromosomal localization of the human PD-1 gene (PDCD1)". Genomics. 23 (3): 704–6.