im体育

服务热线(xian)

+8610-84928167

HSC-NPG 小鼠

1. 基本信息


(1)模(mo)型(xing)简介

辐(fu)照清髓(sui)的(de)NPG小(xiao)鼠(shu)(shu)移植(zhi)来自人(ren)(ren)(ren)(ren)的(de)脐(qi)带血(xue)、胎肝的(de)造(zao)血(xue)干细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(HSC)的(de)模(mo)型(xing)。造(zao)血(xue)干细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)是(shi)(shi)(shi)所有造(zao)血(xue)和免(mian)(mian)疫(yi)(yi)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)共同(tong)祖细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)。HSC 移植(zhi) NPG 类(lei)高度(du)免(mian)(mian)疫(yi)(yi)缺(que)陷小(xiao)鼠(shu)(shu)之后可以(yi)定(ding)(ding)植(zhi)于(yu)小(xiao)鼠(shu)(shu)骨髓(sui),并(bing)不(bu)(bu)断产生(sheng)各(ge)类(lei)造(zao)血(xue)、免(mian)(mian)疫(yi)(yi)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao),如 T 细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)、B 细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)、NK 细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)、髓(sui)系(xi)(xi)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)等。由(you)于(yu)其免(mian)(mian)疫(yi)(yi)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)是(shi)(shi)(shi)在(zai)(zai)小(xiao)鼠(shu)(shu)体(ti)内(nei)(nei)“从头”发(fa)(fa)育(yu)出的(de),对小(xiao)鼠(shu)(shu)宿主(zhu)产生(sheng)耐受,所以(yi)不(bu)(bu)出现 GvHD 现象(xiang),模(mo)型(xing)存活一(yi)年(nian)仍(reng)可以(yi)检测到人(ren)(ren)(ren)(ren)源(yuan)(yuan)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)稳定(ding)(ding)存在(zai)(zai)。这种(zhong)模(mo)型(xing)的(de)缺(que)点(dian)是(shi)(shi)(shi)发(fa)(fa)育(yu)出的(de) T 细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)功能较弱。这是(shi)(shi)(shi)因(yin)(yin)为(wei) T 细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)需要在(zai)(zai)胸腺(xian)中完成(cheng)“education”过(guo)程,T 细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)受体(ti)形成(cheng) MHC 限(xian)(xian)制性。人(ren)(ren)(ren)(ren)源(yuan)(yuan) T 细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)前体(ti)在(zai)(zai)小(xiao)鼠(shu)(shu)胸腺(xian)内(nei)(nei)完成(cheng)发(fa)(fa)育(yu),可能既表现小(xiao)鼠(shu)(shu) MHC 限(xian)(xian)制性,也表现 HLA 限(xian)(xian)制性,造(zao)成(cheng)与(yu)人(ren)(ren)(ren)(ren)源(yuan)(yuan)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)相互作用(yong)类(lei)似(si)于(yu)异(yi)体(ti)(allo-)或异(yi)种(zhong)(xeno-)排斥反应(ying)。另外(wai),这种(zhong)模(mo)型(xing)的(de)另一(yi)个缺(que)陷是(shi)(shi)(shi)髓(sui)系(xi)(xi)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)发(fa)(fa)育(yu)不(bu)(bu)足,原因(yin)(yin)是(shi)(shi)(shi)某些调控(kong)发(fa)(fa)育(yu)的(de)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)因(yin)(yin)子(zi)在(zai)(zai)人(ren)(ren)(ren)(ren)鼠(shu)(shu)之间存在(zai)(zai)种(zhong)属差异(yi),鼠(shu)(shu)的(de)因(yin)(yin)子(zi)对人(ren)(ren)(ren)(ren)的(de)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)无作用(yong),造(zao)成(cheng)模(mo)型(xing)中人(ren)(ren)(ren)(ren)源(yuan)(yuan)髓(sui)系(xi)(xi)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)含(han)量偏低。


(2)制作方法

高度免(mian)疫缺陷(xian)小鼠(shu)(shu)(shu)NPG经射线亚致死性辐照,破坏小鼠(shu)(shu)(shu)自体骨髓(sui)造血(xue)(xue)功能,再(zai)通过静脉注射、骨髓(sui)腔内(nei)注射或新生鼠(shu)(shu)(shu)肝内(nei)注射等(deng)途径移植人(ren)脐带血(xue)(xue)、骨髓(sui)、胎肝等(deng)来源的造血(xue)(xue)干细(xi)胞,12周(zhou)以后采血(xue)(xue)检测人(ren)源各系(xi)血(xue)(xue)细(xi)胞的重建,确定(ding)血(xue)(xue)液中(zhong)人(ren)/鼠(shu)(shu)(shu)细(xi)胞的嵌合比率(见图(tu)1)。

5dca1e6aa0b0a.png

图1  HSC-NPG小鼠制(zhi)作流程示意图。


2.成功案(an)例

im体育已经完成几千例的(de)NPG小(xiao)(xiao)鼠(shu)HSC-NPG小(xiao)(xiao)鼠(shu)模型制作和商业化稳定(ding)供应。移(yi)植人造血(xue)干细胞(bao)(HSCs)后(hou),可以(yi)高(gao)水平重建造血(xue)系统(tong)。8周人CD45+细胞(bao)比例可以(yi)达到40%以(yi)上。早期(qi)主要是B细胞(bao)比例高(gao);12周以(yi)及更长时间(jian)之后(hou),人源造血(xue)细胞(bao)稳定(ding)重建,T细胞(bao)所占比例逐渐升高(gao)。


(1)人造血(xue)干细胞(HSCs)移植NPG小(xiao)鼠可以高水平重(zhong)建造血(xue)系统(tong)。

5dca1eb1dbb9b.png

图(tu)2  NPG小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)移植(zhi)(zhi)人(ren)造血干细(xi)胞(HSCs)后,可以(yi)高(gao)水平重建(jian)造血系统。左(zuo)图(tu)为(wei)(wei)将 5×104脐带(dai)血CD34+细(xi)胞通过骨髓移植(zhi)(zhi)入6-8周的NPG小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)后检(jian)测结果; 右(you)图(tu)为(wei)(wei)1×105脐带(dai)血CD34+细(xi)胞移植(zhi)(zhi)后16周在NPG小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)脾脏中检(jian)测到高(gao)水平的人(ren)CD45+细(xi)胞。


(2)人造血(xue)(xue)干细胞(HSCs)移(yi)植NPG小鼠后重建各系造血(xue)(xue)细胞比例检测(ce)。

5dca1ee26c59a.png

图3人造血干细(xi)(xi)胞(bao)(HSCs)移(yi)植NPG小鼠(shu)后获得各系造血细(xi)(xi)胞(bao)分化的(de)高水平重建。上图显示的(de)为将5×104脐带血CD34+细(xi)(xi)胞(bao)移(yi)植16周后,在NPG小鼠(shu)外周血中检测(ce)到高水平的(de)人CD45+细(xi)(xi)胞(bao)(46.54%)、CD19+ B细(xi)(xi)胞(bao)(70.9%)、CD3+ T细(xi)(xi)胞(bao)(17.33%)和CD33+髓系细(xi)(xi)胞(bao)(8%)。


 5dca1f2816e42.png5dca1f1f03f87.png


图4 人造血(xue)干细胞(bao)(bao)(bao)(HSCs)移植(zhi)NPG小(xiao)鼠(shu)后(hou)各系细胞(bao)(bao)(bao)重建(jian)。脐带血(xue)CD34+细胞(bao)(bao)(bao)移植(zhi)NPG小(xiao)鼠(shu)12周以及更(geng)长时间之后(hou),人源(yuan)造血(xue)细胞(bao)(bao)(bao)稳定(ding)重建(jian),T细胞(bao)(bao)(bao)所占比(bi)例逐渐升(sheng)高。



3.应用领域

-造(zao)血、免疫生物(wu)学研究

-血液病(bing)研究

-艾滋(zi)病(bing)等血液系(xi)统(tong)传染病(bing)研究

-移植(zhi)免(mian)疫(yi)研究

-肿瘤(liu)(liu)免(mian)疫研(yan)(yan)究,包括(kuo)肿瘤(liu)(liu)微环境研(yan)(yan)究,免(mian)疫调(diao)节性抗肿瘤(liu)(liu)药物评(ping)价(jia)(jia)、激活T细胞的抗肿瘤(liu)(liu)双特异性抗体(ti)药效评(ping)价(jia)(jia)等

-基因(yin)治疗研究