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Hu-URG

URG小(xiao)鼠(shu)诱(you)(you)导肝(gan)损伤之(zhi)后可以(yi)移(yi)植(zhi)人(ren)(ren)源(yuan)肝(gan)细(xi)胞(bao),建立的模型称为人(ren)(ren)源(yuan)化肝(gan)脏小(xiao)鼠(shu)Hu-URG。URG小(xiao)鼠(shu)的优点是,不(bu)诱(you)(you)导时uPA并不(bu)表(biao)达(da),小(xiao)鼠(shu)健康生长(zhang);当用Dox诱(you)(you)导时,Tet-On系统驱动的uPA即(ji)在肝(gan)内表(biao)达(da),小(xiao)鼠(shu)出现肝(gan)损伤,此时可接受外源(yuan)肝(gan)细(xi)胞(bao)的植(zhi)入。人(ren)(ren)源(yuan)肝(gan)细(xi)胞(bao)移(yi)植(zhi)可以(yi)在URG小(xiao)鼠(shu)实(shi)现高达(da)80%的整肝(gan)重(zhong)建,且(qie)移(yi)植(zhi)窗(chuang)口期不(bu)受限制(zhi)。

 

模型特征(zheng)

(1)URG移植人(ren)肝(gan)细胞可以实现高达80%的(de)替换率,分泌(mi)到外周血中的(de)人(ren)白(bai)蛋白(bai)逐步升高,可达数毫(hao)克/毫(hao)升的(de)水平。

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图1 URG小鼠的人(ren)肝(gan)细(xi)(xi)胞(bao)(bao)重(zhong)建。(A,B) HE染色(se)显示人(ren)鼠嵌(qian)合(he)肝(gan)脏的形成,染色(se)浅的部分为人(ren)肝(gan)细(xi)(xi)胞(bao)(bao)簇;(C)人(ren)肝(gan)细(xi)(xi)胞(bao)(bao)移植后,随着(zhe)时间延长,小鼠外周血中人(ren)白蛋白水平逐(zhu)渐(jian)升高。

 

(2)URG嵌合肝(gan)脏(zang)中人肝(gan)细胞保持了正常功(gong)能。RT-PCR 和免疫组化(Albumin, CK18, CYP3A4)确认人源化肝(gan)脏(zang)小鼠(shu)嵌合肝(gan)中人特(te)异标(biao)记分子的表达。

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图(tu)2 人源(yuan)化肝(gan)脏(zang)的RT-PCR 和免(mian)疫组(zu)化分(fen)(fen)析(xi)。(A)嵌(qian)(qian)合(he)肝(gan)脏(zang)RT-PCR分(fen)(fen)析(xi),表明(ming)人肝(gan)特异的代谢酶基因表达;(B)嵌(qian)(qian)合(he)肝(gan)脏(zang)人Albumin, CK18, CYP3A4免(mian)疫组(zu)化染色阳性。

 

(3)人(ren)源化肝脏URG小(xiao)鼠可感染人(ren)类专嗜的(de)乙肝病毒(du)HBV。

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图3 人(ren)(ren)源化(hua)肝脏URG小鼠支(zhi)持人(ren)(ren)HBV病(bing)毒(du)的感(gan)染(ran)。(A)定量RT-PCR分(fen)析(xi)人源化URG小鼠外(wai)周血中的HBV DNA;(B,C)嵌(qian)合肝脏切(qie)片(pian)HBV表面抗原和核(he)心抗原染色(se)阳性。



(4)人源化肝(gan)脏URG小(xiao)鼠(shu)可感染人类专(zhuan)嗜的(de)丙肝(gan)病毒HCV。

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图4  人(ren)源(yuan)化(hua)肝(gan)脏URG小(xiao)鼠支持人(ren)HCV病(bing)毒的感(gan)染。嵌合肝(gan)脏切(qie)片(pian)免疫组化检测到HCV-NS3蛋白(bai)(bai)和HCV-NS4蛋白(bai)(bai)的(de)表达(da)。

 



(5)人源化肝脏URG小(xiao)鼠可应用于(yu)药物(wu)代谢和药物(wu)相互(hu)作用的体内研究(jiu)。

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图5 人(ren)(ren)源化肝脏URG小(xiao)鼠(shu)(shu)对药物(wu)的代谢不同于普(pu)通(tong)小(xiao)鼠(shu)(shu)而更(geng)接(jie)近人(ren)(ren)类。



 

(6)URG小鼠可应(ying)用于体外诱(you)导分化产生(sheng)的类肝细(xi)胞的体内功能验证研究(jiu)。

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图(tu)6 URG小鼠应用于诱导分(fen)化的人肝细胞(hiHep)的体内功能验证(zheng)。

 

 

应用领域

-URG® 小(xiao)(xiao)鼠(shu)和肝脏(zang)人(ren)源化URG® 小(xiao)(xiao)鼠(shu)可以用于人(ren)特有的肝病、药物(wu)安全(quan)性评(ping)估和人(ren)特异的肝脏(zang)代谢(xie)酶(mei)相关的研究;

-HBV,HCV感染研究;

-药(yao)物代谢(xie)与药(yao)物相互作用研究;

-干细胞研究;

-基(ji)因治疗研究(jiu)。

 

参考文献

(1)Xijun Song,Yushan Guo,Shuguang Duo,Jie Che,Chen Wu,Takahiro Ochiya,Mingxiao Ding,Hongkui Deng.A Mouse Model of Inducible Liver Injury Caused by Tet-On Regulated Urokinase for Studies of Hepatocyte Transplantation.The American Journal of Pathology.Volume 175, Issue 5, November 2009, Pages 1975-1983.

2Du Y., Wang J., Jia J., Song N., Xiang C., Xu J., Hou Z., Su X., Liu B.,Jiang T., et al. (2014). Human hepatocytes with drug metabolic function induced from fibroblasts by lineage reprogramming. Cell Stem Cell, 14,394–403.

3Xie B., Sun D., Du Y., et al. Cell Res. 2019 Sep;29(9):696-710.

4Feng J., Yang G., Liu Y., et al. Theranostics. 2019 Jul 9;9(18):5227-5245.