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URG 小鼠

1.基本信(xin)息

品系名称:NOD.Cg-Tg(tetO- Alb- uPA)1Deng Rag2tm1VstIl2rgtm1Vst /Vst

常(chang)用名:URG®小鼠;Tet-uPATg Rag2null Il2rgnull 小鼠

背景:NOD

毛色:白色


品系建立:

URG®小鼠,由4种基因修饰动物模型交配获得,包含2个转基因和2个基因敲除。2006年,宋希军等研究人员构建了TRE-uPA 转基因小鼠和Alb-rtTA转基因小鼠,然后交配获得了Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性小鼠;通过Dox诱导,在该小鼠中检测到了uPA表达和肝损伤[1]。im体育技术人员将Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性小鼠连续8代回交到NRG(NOD背景的Rag2null Il2rgnull小鼠)背景,2012年获得Alb-rtTA/ TRE-uPA/Rag2null/Il2rgnull 小鼠,商品名为URG®小鼠。

作为新一代的可调控肝损伤人源化肝脏小鼠模型[2~6],人源肝脏细胞可以实现20-95%整肝重建。


2. 表(biao)型

(1)URG®同NRG(NOD-Rag2null Il2rgnull)小鼠一样,可以常规扩繁,并且可以在任何时间点用Dox诱导肝损伤。

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图1  URG®小鼠肝(gan)损伤分(fen)析。在不诱导(dao)时,检测不到表(biao)达(da)uPA表(biao)达(da)(C);在DOX饮水诱导(dao)后,免疫组化可以检测到uPA的表(biao)达(da)(D)。uPA表(biao)达(da)的肝(gan)脏呈(cheng)苍白(bai)色(F);野生小鼠的肝(gan)脏是暗红色(G)。HE染色可见URG®小鼠肝(gan)细(xi)胞(bao)空泡化(H),而对照小鼠肝(gan)细(xi)胞(bao)形态(tai)正常(I)。


(2)URG®人肝脏细胞可以实现20%~95%的重建,外周血中人ALb逐步升高到毫克级的水平

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图2 URG®小鼠人肝细胞重建。(A,B) HE染色证明人肝脏细胞在URG小鼠肝脏中成功重建,染色浅的部分为人肝脏细胞;(C)人肝细胞移植后,随着时间延长,小鼠外周血中人血清白蛋白(human albumin)水平逐渐升高到毫克级水平。


(3)RT-PCR 和免疫组化(Albumin, CK18, CYP3A4)确认(ren)肝脏(zang)人源化URG®小鼠嵌合(he)肝中人特异(yi)标(biao)记表达

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图(tu)3  人(ren)源化URG®小(xiao)鼠(shu),人(ren)鼠(shu)嵌合鼠(shu)肝脏RT-PCR分析表达人(ren)特异(yi)的(de)基(ji)因(A);和人(ren)Albumin, CK18, CYP3A4免疫(yi)组(zu)化染色阳性(B)。


(4)肝脏人源化URG®小鼠HBV感染和HBV核心和C抗原组化染色

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图4  人(ren)源(yuan)化(hua)URG®小鼠(shu),支持人(ren)HBV病毒的(de)感染。A,人(ren)源(yuan)化(hua)URG®小鼠(shu)外周(zhou)血中,HBV拷贝(bei)数的(de)定量RT-PCR分析;B,HBV表面抗原和核心抗原染色阳性(xing)。


3. 应用领(ling)域

-URG® 小鼠和肝脏人源化URG® 小鼠可以用于人特异的肝病、药物安全性评估和人特异的肝脏代谢酶相关的研究

-HBV,HCV感(gan)染研(yan)究

-药物代谢与药代动(dong)力(li)学研究

-干细胞研(yan)究

-基因(yin)治(zhi)疗


4. 参考文(wen)献

(1)Xijun Song,Yushan Guo,Shuguang Duo,Jie Che,Chen Wu,Takahiro Ochiya,Mingxiao Ding,Hongkui Deng.A Mouse Model of Inducible Liver Injury Caused by Tet-On Regulated Urokinase for Studies of Hepatocyte Transplantation.The American Journal of Pathology.Volume 175, Issue 5, November 2009, Pages 1975-1983.

(2)Du, Y., Wang, J., Jia, J., Song, N., Xiang, C., Xu, J., Hou, Z., Su, X., Liu, B.,Jiang, T., et al. (2014). Human hepatocytes with drug metabolic function induced from fibroblasts by lineage reprogramming. Cell Stem Cell, 14,394–403.

(3)Azuma, H. et al. Robust expansion of human hepatocytes in Fah-/-/Rag2-/-/Il2rg-/- mice. Nature biotechnology 25, 903-910, doi:10.1038/nbt1326 (2007).

(4)Bissig, K. D. et al. Human liver chimeric mice provide a model for hepatitis B and C virus infection and treatment. The Journal of clinical investigation 120, 924-930, doi:10.1172/JCI40094 (2010).

(5)Xu, D. et al. Chimeric TK-NOG mice: a predictive model for cholestatic human liver toxicity. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics 352, 274-280, (2015).

(6)Lander FoquetElizabeth M. WilsonLieven VerhoyeMarkus GrompeGeert Leroux-RoelsJohn BialPhilip Meuleman. Successful Engraftment of Human Hepatocytes in uPA-SCID and FRG® KO Mice.Hepatocyte Transplantation pp 117-130.